分离神经元脂滴并进行脂质组学分析以揭示神经退行性疾病的脂质图谱

近年来的进展拓展了脂滴（LDs）的作用，使其不再局限于被动的脂质储存，还表明其参与哺乳动物各组织中的多种代谢过程。神经元脂滴的存在长期存在争议，如今已在若干神经结构中被鉴定出来，这引发了关于其在神经退行性疾病中所起作用的问题。阐明这些细胞器在神经元内的具体化学组成，对于理解其在神经病理中的作用至关重要。然而，神经元中固有的亚微米尺寸和低丰度，给其分离以及物理和生化表征带来了挑战。在此，我们介绍克服这一障碍的实验方案：我们阻断神经元特异性甘油三酯脂肪酶以增大脂滴，使其能够在蔗糖梯度中漂浮。我们进一步对从培养的原代神经元中纯化的脂滴采用了改进的脂质组学分析方法，从而深入了解其独特的脂质组成。具备神经元培养、成像、超速离心机操作和液相色谱–质谱分析基本专业技能的研究人员均可实施本方案。完整工作流程从神经元培养到脂质组学分析需要 3–4 周。未来将该方法与高通量技术相结合，有望揭示脂质代谢中的疾病特异性改变，为潜在的治疗干预提供新途径。

中文由 AI 翻译，仅供参考，以原文为准。