ClearGel：一种用于经完整颅骨进行慢性、近毫米级双光子成像的热响应水凝胶

完整的颅骨仍然是活体小鼠高分辨率双光子神经成像的根本障碍。然而，现有的颅骨透明化方法无法同时提供深部皮层通路、空间选择性、可逆性和生物安全性。在此，我们介绍 ClearGel，一种热响应性水凝胶，它在接触颅骨后迅速原位凝胶化，将透明化试剂限制在目标区域，同时持续释放。ClearGel 常规上能够通过完整颅骨实现深达约 800 m 的双光子成像——这一深度在统计上等同于开颅窗，并大幅超越所有先前方法。它支持从局灶位点到全颅覆盖的用户自定义透明化模式，允许通过可逆光学界面在 14 天内重复成像，并且关键的是，能够在单细胞分辨率下实现清醒功能成像，包括神经元 Ca2+ 活动和更难以捕捉的 cAMP 动态。ClearGel 仅需简单的局部应用——无需开颅或颅骨磨薄——并为行为小鼠皮层功能的纵向研究提供微创、慢性兼容的光学窗口。

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